摘 要

本实验通过高效液相色谱法（reverse phase high-performance liquid chromato- graphy，RP-HPLC）测定染发剂中2,6-二羟乙氨基甲苯、3-硝基对羟乙氨基酚、2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚、5-氨基-4-氯邻甲酚4种禁限用物质的含量。通过绘制标准曲线标准曲线经线性回归后求得相关系数。绘制方法如下：（1）将4种物质的混合标准溶液以1,2,5,10,50,100的比例稀释；（2）根据测得的不同浓度混合标准溶液的峰面积绘制出4种上述物质的标准曲线。建立序列工作液，使用乙腈（AR）—甲醇（AR）—磷酸盐流动相按特定配比梯度洗脱。建立HPLC检测方法对所得样品进行HPLC分析，检测样品中上述物质含量。建立的方法可以较好检测染发剂中2,6-二羟乙氨基甲苯、3-硝基对羟乙氨基酚、2-氨基-6-氯-4-硝基苯酚、5-氨基-4-氯邻甲酚四种组分含量进行定量分析，方法具有简单，快捷，重现性好等特点。

关键词：高效液相色谱法（HPLC）；禁限用物质；染发剂

Study on Detection Methods of Forbidden Substances in Hair Dyes

ABSTRACT

In this experiment, 2,6-dihydroxyethylaminotoluene, 3-nitro-p-hydroxyethylaminophenol, 2 in the hair dye were determined by reverse phase high-performance liquid chromatograph (RP-HPLC).-Amino-6-chloro-4-nitrophenol,5-amino-4-chloro-o-creso four kinds of restricted substances. The content of the four forbidden substances in the hair dye was determined by plotting the peak area-concentration standard curve. The standard curve is drawn as follows: (1) The mixed standard solution of the four substances is diluted at a ratio of 1, 2, 5, 10, 50, 100; (2) Four kinds of peak areas of the mixed standard solution are measured according to the measured different concentrations. The standard curve for the above substances. The sequence working solution was established using an acetonitrile (AR)-methanol (AR)-phosphate mobile phase eluted at a specific ratio. The HPLC test method was established to perform HPLC analysis on the obtained sample, and the content of the above substance in the sample was detected. The established method can better detect 2,6-dihydroxyethylaminotoluene,3-nitro-p-hydroxyethylaminophenol,2-amino-6-chloro-4-nitrophenol, 5-amino-4- in hair dye Qualitative and quantitative detection of four components of chloro-o-cresol is simple, fast and reproducible.

Key words：High performance liquid chromatography (HPLC); forbidden substances; hair dyes

目 录

1 绪论………………………………………………………………………………………1

1.1 染发剂禁限用物质概述………………………………………………………………1

1.1.1 染发剂的分类…………………………………………………1

1.2 几种同类物质的介绍…………………………………………………………………………1

1.2.1 对苯二胺…………………………………………………1

1.2.2 对硝基酚…………………………………………………2

1. 2. 3 2-氨基-4-硝基苯酚…………………………………………………2

1.2.4 5-氨基邻甲酚…………………………………………………2

1.2.4 国内外检测方法现状…………………………………………………2

1.3 气相色谱法…………………………………………………………………………3

1.3.2 气相色谱法原理………………………………………………3

1.3.3 气相色谱法的特点…………………………………………………3

1.4 超高效液相色谱法…………………………………………………………………………4

1.4.1 超高效液相色谱法概述…………………………………………………4

1.4.2 HPLC仪器组成…………………………………………………4

1.4.3 超高效液相色谱的应用…………………………………………………5

2 实验部分………………………………………………………………………………6

2.1 实验材料……………………………………………………………………6

2.1.1 材料与试剂…………………………………………………6

2.1.2 主要仪器…………………………………………………6

2.2 标准溶液的配制…………………………………………………………………………7

2.2.1 储备液的配制…………………………………………………7

2.2.2 混合标准溶液的配制…………………………………………………7

2.2.3 标准曲线的建立…………………………………………………7

2.3 样品前处理………………………………………………………………………………7

2.4 色谱柱条件………………………………………………………………………………7

2.5 检出限和定量限………………………………………………………………………………8

3 结果与讨论………………………………………………………………………………9

3.1色谱柱的选择……………………………………………………………………9

3.2流动相的选择……………………………………………………………………9

3.3检测波长的选择……………………………………………………………………10

3.4洗脱方式的选择……………………………………………………………………10

3.5标准曲线……………………………………………………………………13

3.6检出限与定量限……………………………………………………………………14

3.7精密度实验……………………………………………………………………15

3.8加标回收率……………………………………………………………………15

3.9检测结果……………………………………………………………………16

结论 ………………………………………………………………17

致谢 ……………………………………………………………18

参考文献 ………………………………………………………19

第一章 绪论

• 1. 染发剂禁限用物质概述

1.1.1 染发剂分类

目前市场可见的染发剂分类主要有：植物型染发剂、金属型染发剂和氧化型染发剂三种。植物型染发剂原料多以植物和中草药为主，生产难度较大，成本高。其原理是染发剂物理附着，在毛发上覆盖，故染发效果差，易褪色，但因其原材料原因相对较为安全。金属盐类染发剂是一种渐进式的染发产品，主要用于灰色发色的渲染，常以醋酸铅为染发原料。铅具有较强的毒性，对人体的生殖系统和神经系统有着巨大危害，口服2克既能中毒，50克左右便可致人死亡[1]。

氧化型染发剂的有效成分是苯胺和苯酚衍生物，此类物质具有较强的生物毒性，可致癌对人体危险较大，若超标使用将对身体健康和环境安全造成不可逆的巨大危害。因此《化妆品卫生规范》中规定了染发剂中93种暂时允许使用的染料和它们的限度[2]。

1.2 几种同类物质的介绍