摘 要

银杏叶提取物（GBE）具有很高的药用价值，银杏黄酮和内酯是主要的活性成分，对心脑血管疾病等有很好的疗效。本文采用有机溶剂-D101大孔树脂法对银杏叶有效成分进行提取纯化并用高效液相色谱（HPLC）对GBE中有效成分含量测定。本实验考查了D101大孔树脂上样液浓度、上样液pH值、洗脱剂浓度、洗脱剂pH值等因素对银杏黄酮吸附率的影响，优化了纯化工艺，在上样液pH=5，稀释2倍，用pH=5的70%乙醇洗脱时可得到含银杏黄酮24.11%、内酯6.23%的银杏叶提取物，达到了《中国药典》的要求。

关键词：银杏叶提取物；大孔树脂；高效液相色谱（HPLC）；提取工艺

The extraction process of ginkgo biloba extract

ABSTRACT

Ginkgo biloba extract (GBE) has high medicinal value, ginkgo biloba flavone and lactone is the main active ingredient, such as cardiovascular and cerebrovascular diseases have a good effect. In this paper, the organic solvent-D101 macroporous resin method of active ingredients of ginkgo biloba extract purified by High Performance Liquid Chromatography(HPLC)for detecting active ingredient content in GBE. This experiment examines the D101 macroporous resin on the sample liquid concentration, pH value, eluent concentration and pH value on the absorption rate of the ginkgo biloba extract, purification process was optimized and get 2 times in the sample solution concentration dilution, pH=5.7% ethanol, pH=5 des got under the condition of ginkgo biloba extract 24.11%, lactones of ginkgo biloba extract 6.23%, has reached the requirement of "Chinese pharmacopoeia".

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Key words：Ginkgo biloba；macroporous resin；High Performance Liquid Chromatography(HPLC)；Extraction process.

目 录

第一章 绪论 1

1.1 银杏叶中的化学成分 1

1.1.1 银杏叶中黄酮及其甙类化合物 1

1.1.2 萜内酯类化合物 2

1.1.3 酚酸类化合物 3

1.1.4 聚戊烯醇类化合物 4

1.1.5 儿茶素类化合物 4

1.2 银杏叶提取物的应用 4

1.2.1 抗氧化作用 5

1.2.2 对中枢神经系统的作用 5

1.2.3 镇痛和消炎作用 5

1.2.4 保护脑水肿、脑缺血、改善脑功能的作用 5

1.2.5 保护胃粘膜作用 6

1.3 银杏叶提取物提取工艺 6

1.3.1 黄酮类化合物的提取 6

1.3.2 酚酸类化合物的提取 8

1.3.3 内酯类化合物的提取 8

1.4 实验目的和内容 9

1.4.1 实验目的 9

1.4.2 实验内容 10

第二章 实验部分 1

2.1 实验原料 1

2.2 实验装置图 2

2.3 实验步骤 2

2.3.1 银杏叶的前处理 2

2.3.2 银杏叶提取物的提取 2

2.3.3 大孔树脂预处理 3

2.3.4 大孔树脂对黄酮吸附性能的影响 3

2.4 标准曲线的绘制 5

2.4.1 黄酮标准曲线的绘制 5

2.4.2 内酯标准曲线的绘制 5

2.4.3 酚酸标准曲线的绘制 5

2.5 提取物中有效成分含量的测定 6

第三章 结果与讨论 7

3.1 大孔树脂对黄酮吸附性能的影响 7

3.1.1 上样液浓度对吸附效果的影响 7

3.1.2 上样液pH 对吸附效果的影响 7

3.1.3 洗脱液浓度（乙醇）对解吸效果的影响 8

3.1.4 洗脱液pH对解吸效果的影响 9

3.2 银杏叶提取物主要成分的测定 9

3.2.1 银杏黄酮工作曲线 9

3.2.2 银杏内酯工作曲线 11

3.2.3 银杏酚酸工作曲线 13

3.3 银杏叶提物中各有效成分含量 14

第四章 结论与展望 15

4.1 结论 15

4.2 不足与展望 15

致 谢 16

参考文献 17

第一章 绪论

银杏（Ginkgo biloba L.），为银杏科、银杏属乔木，别名白果，鸭脚树，蒲扇。银杏是现存种子植物中最古老的孑遗植物，号称活化石，其变种品种有：黄叶银杏、塔状银杏、裂银杏、垂枝银杏、斑叶银杏等^[1]。由于银杏叶提取物主要化学成分黄酮类、内酯类、酚酸类化合物等独特的药用价值，可以归心肺经，敛肺，平喘，活血化瘀，止痛，用于肺虚咳嗽、冠心病、心绞痛、高血脂等治疗^[2]。随着我国经济的发展，银杏叶提取物用于更多的领域，相信我国银杏叶提取物的研究将会跨上一个更高的台阶，其提取工艺也将更上一个台阶^[3]。

1.1 银杏叶中的化学成分

迄今从银杏叶中分离出的极性和非极性化合物有黄酮类化合物、萜内酯，有机酸、烷基酚和烷基酚酸及微量元素等。黄酮类化合物约有35种，按化学成分结构可分为3类，即单黄酮类32种，双黄酮类6种，儿茶素类4种；萜内酯类约有6种(其中二萜类内酯有银杏内酯A、B、C、M、J 5种，倍半萜内酯有白果内酯1种)；有机酸类有D-糖质酸、莽草酸、6-羟基犬喹啉酸3种；多糖类有LGBP-A和-LGBP-B2种；单糖类共有4种。另外，还有有机醇、醛类、酮类、生物碱类、甾醇类、17种氨基酸和25种微量元素，以及维生素、叶绿素、胡萝卜素等^[5]。

1.1.1 银杏叶中黄酮及其甙类化合物

在银杏叶中，黄酮类化合物含量较高，主要有单黄酮、双黄酮及其甙。黄酮分子中含C₅-OH基显浅黄，增加A环上羟基数或者有C₃-OH存在，都能增加环的颜色，C环上有无-OH 或-OCH₃，不影响黄酮环的颜色变化^[6]。这些黄酮类化合物中大多数是槲皮素、山柰酚、异鼠李素及其甙。黄酮类化合物的基本骨架如图1-1。

银杏双黄酮是由两分子黄酮母核，通过C-C键聚合的一类化合物，从银杏叶中已分离出6种双黄酮类化合物。双黄酮的基本骨架如图1-2。双黄酮化合物表见1-3。